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動(dòng)物ELISA試劑盒操作步驟如下

  • 更新時(shí)間:2022-07-06      瀏覽次數(shù):906
    •    動(dòng)物ELISA試劑盒是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。以這些特點(diǎn)在上得到了廣泛的應(yīng)用,由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。廣泛用于定量檢測(cè)各種分子,包括細(xì)胞因子,趨化因子,生長(zhǎng)因子和蛋白酶等。
        
        動(dòng)物ELISA試劑盒操作步驟如下:
        一、樣品準(zhǔn)備:
        1.取動(dòng)物全血按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,無(wú)溶血、無(wú)污染。樣品1周內(nèi)可于2~8℃保存,長(zhǎng)期需置-20℃保存。
        2.用樣品稀釋液將待檢血清按100倍稀釋?zhuān)ㄈ?μl血清加入198μl樣品稀釋液中,混勻)。陰、陽(yáng)性對(duì)照不用稀釋。
        3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。
        
        二、檢驗(yàn)方法:
        1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復(fù)至室溫。
        2.取所需用量酶標(biāo)板條,設(shè)空白對(duì)照1孔、陰性/陽(yáng)性對(duì)照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
        3.空白對(duì)照孔加樣品稀釋液100μl;陰、陽(yáng)性對(duì)照孔分別加入陰、陽(yáng)性對(duì)照100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
        4.混勻,置37℃反應(yīng)30分鐘。
        5.扣去孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,拍干。
        6.每孔加酶標(biāo)記物100μl(空白孔除外)。置37℃反應(yīng)30分鐘。
        7.洗滌,同步驟5。
        8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,37℃避光反應(yīng)10分鐘。
        9.每孔加終止液50μl,混勻,用空白孔調(diào)零,于450nm(可用630nm作參比波長(zhǎng))測(cè)定各孔吸光值(A值)。
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